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多维预混合饲料中维生素E的测定

测定多维预混合饲料中的维生素E有多种的方法。最常用的方法一般会使用将样品进行皂化，然后用溶剂进行萃取，挥发溶剂后再进行稀释，配制到一定的浓度，再进行HPLC的分析。　　我们先来讨论一下皂化的作用。皂化是一种化学反应，是酯类化合物和强碱反应，生成醇和酸的反应，生成的酸再和强碱反应生成盐和水。在饲料的分析中不是利用反应的生成物，而是有以下的作用：　　对于用明胶包膜的维生素组分，可以打开明胶包膜，使内容物溶出。　　对于脂溶性维生素，通过萃取可以去除一部分杂质。　　可以在分析低含量脂溶性维生素样品时，浓缩组分。　　从上面的论述中我们可以了解到，皂化反应在分析维生素E组分时，可以起去除一部分杂质，在分析低含量样品时可以起到浓缩组分的作用。在进行皂化反应和萃取的过程中，操作的难度较高，影响准确度的因素很多，如果操作者不熟练的话，则会得到偏低的结果，甚至测不出维生素E来。因为维生素E醋酸酯经皂化后会变成生育酚，而酚羟基从理论上说是带有酸性的，极易破坏。所以化验员要进行反复的练习后，并经过回收率的测试后，才能进行样品的分析操作。对于多维预混合饲料中的维生素E，一般来说含量比较高，杂质的干扰也可以忽略。因此，下面推荐一种直接萃取的方法来进行分析，操作简单准确度很高;　　多维预混料中维生素E醋酸酯的测定　　试验方法　　除特别注明外，试验中所用试剂均为分析纯，水为相应纯度的水，溶液为水溶液，试验仪器为一般实验室设备。　　试剂和溶液：　　甲醇（HPLC级）　　甲醇　　维生素E醋酸酯对照品　　标准溶液的制备：　　称取维生素E醋酸酯对照品约100mg（准确到0.0001g）,置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀后再精密吸取10.00mL置于另一100mL棕色容量瓶中，用甲醇定容。浓度约为100μg/mL。　　维生素预混料样品溶液的制备：　　称取预混料约1g于100mL的容量瓶中，加入甲醇约70mL，置于50℃超声波水浴中处理20min，冷至室温后用甲醇定容，充分摇匀。再取部分溶液用甲醇进行稀释，最终浓度约在50~120μg/mL，取部分溶液离心，上层清液通过0.45μm滤膜过滤后，用于HPLC测定。　　进样：　　将标准溶液和试样溶液各50μL依次注入仪器进行分析。（进样量可以根据不同的仪器自行调整）　　色谱条件　　色谱柱：Lichrospher100RP-8,C8,5μm,250mm×4.0mm　　流动相：甲醇（HPLC级）　　流速：1.0mL/min　　进样量：50μL　　检测波长：285nm　　运行时间：约7min　　分析结果的计算：　　样品中所含维生素E的效价可依照下式计算：　　Cst×Wst×As×ns　　维生素E=__________________________　　W×Ast×nst　　式中：Cst―维生素E对照品的含量，%；　　Wst―维生素E对照品的质量，mg；　　Ast―维生素E对照品的峰面积；　　As―样品溶液的维生素E峰面积；　　nst―维生素E标准溶液的稀释倍数；　　ns―样品溶液的稀释倍数；　　W―样品的质量，g。　　注：如果样品中杂质太多，在高效液相色谱中与维生素E分离不完全，则应采用皂化的分析方法进行分析。　　使用直接萃取的本方法进行多维预混料中维生素E醋酸酯的分析，其回收率可以高达95％以上，准确度非常的高。

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