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世界首例ROSA26基因打靶猪模型诞生

发布时间:2021-01-05 11:46:11 阅读: 来源:钱包厂家

世界首例ROSA26基因打靶猪模型诞生

本报讯(通讯员朱丹萍记者王丹)日前,吉林大学动物医学学院教授、中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员赖良学博士与美国密西根大学王忠教授合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。利用该模型猪,研究人员成功地实现重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域的效率低下、表型不确定的问题,为揭示和人类干细胞相关的疾病机理和实施干细胞治疗提供了宝贵的大动物实验依据。该研究成果论文日前在线发表在《细胞研究》上。   长期以来,由于缺乏猪胚胎干细胞,转基因猪的制备主要依赖于体细胞基因修饰和体细胞核移植技术。目前,对体细胞的基因修饰主要通过将外源基因随机插入猪基因组,因此外源基因在猪基因组中的整合位点和拷贝数不可控,从而导致外源基因猪体内表达不稳定,转基因猪个体之间表型不均一,因此限制了转基因猪的培育与应用。   该研究团队首先在猪基因组中找到了一个特殊基因位点:ROSA26,处在这个位点后的基因会广泛表达于所有组织和细胞中。在过去的20年中,通过对小鼠ROSA26基因位点的修饰,获得了一系列ROSA26小鼠模型,并在发育生物学以及干细胞研究中发挥了巨大的作用,目前该位点仅在人胚胎干细胞和大鼠中被鉴定和修饰,尚未在大动物中发现及应用。   研究人员利用TALEN介导的基因敲入技术,成功地构建了世界上第一个ROSA26定点敲入Cre重组酶报告基因的大动物模型。该动物模型可在猪体内世系追踪各类干细胞的分化和再生。在此基础上,研究人员在ROSA26位点引入一对异源loxp位点,经重组酶介导的基因交换,成功将EGFP基因替换为红色荧光蛋白tdTomato基因,由此又获得了世界上第一个重组酶介导的基因交换大动物模型。利用该模型,研究人员可将任意基因通过重组酶介导的基因交换插入ROSA26位点,实现目的基因在大动物所有组织中的无差异表达。同时,由于重组酶介导的基因交换无需药物筛选即可获得,从而使获得的转基因猪不携带外源的药物抗性基因,可去除转基因猪农产品的生物安全和食品安全隐患。

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